Hoàn thiện quy trình công nghệ nhân giống hoa lan hoàng thảo bằng công nghệ nuôi cấy mô tế bào.

Abstract

This study aimed to develop an efficient in vitro propagation protocol for the Dendrobium orchid “Den 08.5.2”. Apical buds were effectively sterilized using a 150 ppm nano-silver solution for 45 minutes, resulting in a high rate of aseptic culture establishment (72.22%). Optimal shoot multiplication was achieved on a medium supplemented with 2.5 g/L Hyponex, 0.5 mg/L BAP, 0.2 mg/L α-NAA, 0.2 g/L activated charcoal (AC), 100 mL/L coconut juice and 15 mg/L chitosan. This medium yielded a multiplication rate of 4.3 shoots per explant, with an average shoot length of 2.2 cm and fresh weight of 0.93 g per shoot. Subsequent root development was optimized on a medium containing 2.5 g/L Hyponex, 0.5 mg/L α-NAA, 0.3 g/L AC and 7.5 g/L milled banana, resulting in 5.38 roots per plantlet, with an average root length of 4.17 cm, shoot length of 5.75 cm, and leaf number of 3.56 per plantlet. Finally, plantlets were successfully acclimatized to ex vitro conditions using Sphagnum moss as a substrate, demonstrating a high survival rate of 98.8% and achieving a plant height of 7.82 cm. This optimized protocol provides a foundation for the mass propagation of this valuable orchid cultivar.

Tóm tắt

Nghiên cứu nhằm hoàn thiện quy trình nhân giống in vitro lan hoàng thảo Den 08.5.2. đã được thực hiện. Kết quả nghiên cứu cho thấy: Vật liệu khởi đầu là chồi non in vivo được khử trùng bằng dung dịch nano bạc ở nồng độ 150 ppm trong 45 phút cho hiệu quả khử trùng tốt nhất và cao hơn công thức đối chứng với tỉ lệ mẫu sạch là 78,89%, tỉ lệ mẫu sạch và sống đạt 72,22%, thời gian phát sinh hình thái là 17,3 ngày. Môi trường nhân nhanh tối ưu là 2,5 g/L hyponex + 0,5 mg/L BAP + 0,2 mg/L α-NAA + 0,2 g/L than hoạt tính (THT) + 100 ml/L nước dừa đóng hộp (NDH) + 15 mg/L chitosan với hệ số nhân đạt 4,3 chồi/mẫu, chiều cao chồi 2,2 cm, khối lượng cụm chồi là 0,93 g/cụm, chồi xanh mập. Môi trường tạo cây hoàn chỉnh thích hợp là 2,5 g/L hyponex + 0,5 mg/L α-NAA + 0,3 g/L THT + 7,5 g/L bột chuối tiêu (BCT) với số rễ/cây đạt 5,38 rễ, chiều dài rễ là 4,17 cm, chiều cao cây 5,75 cm, số lá trên cây là 3,56 lá. Giai đoạn ra ngôi cây con lan hoàng thảo được ra ngôi trên giá thể dớn đạt hiệu quả tối ưu với tỷ lệ cây sống đạt 98,8% với chiều cao cây đạt 7,82 cm, khối lượng cây là 1,51 g/cây, tỷ lệ xuất vườn là 91,11%.