NGHIÊN CỨU NHÂN GIỐNG LAN KIẾM BA BỂ (Cymbidium aloifolium (L.) Sw.) BẰNG KỸ THUẬT IN VITRO

Abstract

This study aims to develop an in vitro propagation protocol for the Ba Be Cymbidium orchid (Cymbidium aloifolium (L.) Sw.) to contribute to the conservation of this species, provide a basis for related research and supply orchid seedlings to the market. Orchid capsules were cleaned and sterilized with 0.1% HgCl₂ solution for 20 minutes, resulting in a contamination - free survival rate of 66.67%. The optimal basal medium for propagation was MS + 30 g/L sucrose + 5.5 g/L agar, pH 5.6 - 5.8, achieving a shoot multiplication coefficient of 1.69. To enhance the efficiency of shoot multiplication, the basal medium was supplemented with the following: Coconut water (100 ml/L), resulting in a shoot multiplication coefficient of 3.37; BAP (1 mg/L), achieving a coefficient of 3.76; kinetin (1.5 mg/L), yielding a coefficient of 3.52. During the rooting stage, culture samples grown on a basal medium supplemented with 1.5 mg/L NAA achieved a root multiplication coefficient of 3.72. The addition of 1 g/L activated charcoal (AC) to the medium containing 1.5 mg/L NAA further optimized the root multiplication coefficient, reaching 4.4. The best substrate for acclimatizing in vitro seedlings was a mixture of wood and pumice (1: 1), achieving a survival rate of 93.33%.

Tóm tắt

Nghiên cứu này nhằm xây dựng quy trình nhân giống in vitro cây lan kiếm Ba Bể (Cymbidium aloifolium (L.) Sw.) góp phần bảo tồn loài lan này, làm cơ sở cho các nghiên cứu liên quan cũng như cung cấp nguồn giống lan cho thị trường. Quả lan được rửa sạch, khử trùng bằng dung dịch HgCl₂ 0,1% trong 20 phút, cho tỉ lệ mẫu sống không nhiễm là 66,67%. Môi trường nền thích hợp cho nhân giống là môi trường MS + đường 30 g/l + agar 5,5 g/l; pH = 5,6 - 5,8; cho hệ số nhân chồi đạt 1,69. Để nâng cao hiệu quả nhân nhanh mẫu, bổ sung thêm vào môi trường nền: Nước dừa (100 ml/l) cho hệ số nhân chồi đạt 3,37; BAP (1 mg/l) cho hệ số nhân chồi đạt 3,76; kinentin (1,5  mg/l) cho hệ số nhân chồi đạt 3,52. Giai đoạn ra rễ, mẫu nuôi cấy trên môi trường nền bổ sung NAA 1,5 mg/l cho hệ số nhân rễ đạt 3,72. Khi bổ sung thêm than hoạt tính (THT) 1 g/l, mẫu nuôi cấy trên môi trường nền + NAA 1,5 mg/l + THT 1 g/l, cho hệ số nhân rễ tối ưu đạt 4,4. Giá thể tốt nhất cho cây con in vitro là giá thể bao gồm gỗ và đá bọt pumice (1: 1), với tỉ lệ cây sống sót là 93,33%.