XÁC ĐỊNH LOÀI, KIỂU GIÁP MÔ VÀ CÁC YẾU TỐ ĐỘC LỰC CỦA VI KHUẨN Pasteurella multocida PHÂN LẬP TỪ LỢN

Abstract

We applied PCR for confirmation of genus and determination of capsule type, virulence genes of 83 pathogenic Pasteurella multocida strains isolated from diseased pigs. By using specific primers, KMT1, 83/83 (100%) strains were confirmed as Pasteurella multocida. Type A, B and D were respectively detected from 40/83 strains (48.6%), 24/83 strains (28.9%), and 19/83 strain (22.9%). Type E and F were not found. The presence of 10 genes for virulence factors was tested. The result of PCR showed the presence of virulence genes: adhesins group (ptfA - 93.97%, pfhA- 93.97%. fimA - 90.36%), iron acquisition (exbB - 100%, exbD - 85.22%), hyaluronidase (pmHAS – 84.33%), protectins (ompA - 56.62%, ompH - 68.67%, oma87 - 100%). The dermonecrotic toxin encoding gene (toxA) showed low prevalence (19%). There is significant association between some virulence factors and specific capsular types of P. multocida. While all of strains belonging to type A were positive with pmHAS gene, almost all of strains of type D carried toxA gene.

Tóm tắt

Áp dụng phản ứng PCR để xác định loài, các gen quy định sinh tổng hợp giáp mô và các yếu tố độc lực của 83 chủng vi khuẩn Pasteurella multocida phân lập từ lợn tại Việt Nam. Kết quả cho thấy, bằng cặp mồi đặc hiệu KMT1 tất cả 83 chủng đều cho phản ứng dương tính, chứng tỏ tất cả 83 chủng đều chính xác là P. multocida. Trong số đó, 40 (48,6%) chủng thuộc type A, 24 (28,9%) chủng thuộc type D, và 19 (23,81%) chủng thuộc type B. Không có chủng nào thuộc type E hay type F. Sự có mặt của các gene độc lực của vi khuẩn P. multocida cũng được khảo sát bằng kỹ thuật PCR, bao gồm kháng nguyên bám dính (ptfA - 93,97%, pfhA- 93,97%. fimA - 90,36%), nhóm thu nhận sắt (exbB - 100%, exbD - 85,22%), hyaluronidase (pmHAS – 84,33%), nhóm protein màng ngoài (ompA - 56,62%, ompH - 68,67%, oma87 - 100%). Tỷ lệ gene mã hóa độc tố PMT (toxA) được tìm thấy ở 16/83 (19%) chủng. Có sự liên quan chặt chẽ giữa một số yếu tố độc lực và serogroup đặc trưng, tất cả các chủng thuộc type A đều mang gen pmHAS, trong khi đó đa số các chủng thuộc type D đều mang gen độc tố PMT (toxA).